综合实验

Ⅰ 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定

1. 氯霉素酰基转移酶重组蛋白的诱导表达
2. 氯霉素酰基转移酶重组蛋白的分离，纯化——NTA亲和层析
3. 氯霉素酰基转移酶重组蛋白的鉴定——SDS聚丙烯酰胺电泳

Ⅱ 基因克隆技术——pGEM-XY1重组质粒的构建和鉴定

1．分离制备待克隆的DNA片段——聚合酶链式反应技术（PCR）
2．靶DNA片段与载体的体外连接
3．重组DNA分子电转化入宿主细胞
4．筛选、鉴定阳性重组子

Ⅲ 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定

1． 多糖的提取与定量
2． 多糖的粗分级——酸性乙醇分步沉淀法
3． 多糖纯化——DEAE Sepharose柱层析
4． 多糖的鉴定
1． 单糖组分分析——薄层层析
2． 红外光谱在多糖分析上的应用

IV 胰蛋白酶酶的动力学研究

1．猪胰蛋白酶的制备
2．胰蛋白酶活力单位及比活性的测定
3．ＰＨ对酶活性的影响
4．温度对酶活性的影响
5．抑制剂对酶活性的影响
6．底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数（Ｋm）的测定